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层析柱详细的操作方法是怎样的？

取适量冬凌草甲素对照品及由上述方法得到的冬凌草甲素样品溶解后点于同一硅胶G薄层板上，以氯一(8:2)为展开剂进行展开，5%香草醛乙醇液显色，于105。C烘至斑点清晰。表明在该展开系统下，冬凌草甲素样品和对照品都具有相同的RF值，并呈现出同样的蓝绿点，在制备的冬凌草甲素样品中，没有杂质斑痕。

大型层析柱的特点及简介

大型层析柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或**玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度，树脂柱厂家供应，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外， 直径加大，洗脱液体体积增大，样品稀释度大。分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关。大型层析柱

以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例

吸附剂的处理及柱子装填

将一定量薄层层析硅胶装人搪瓷盘置于烘箱中，取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充，树脂柱价格，填满整个柱体，不留死体积，密封后用柱塞式计量溶剂泵按一比例泵人溶剂，至溶剂流出止。

装柱。将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积（），装上蓄液球，树脂柱厂家批发，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用（）将其冲入柱中。

压实。沉降完成后，加入更多的，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。柱床约被压缩至9/10体积。无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

上样。干法湿法都可以。海沙是没必要的。上样后，加入一些洗脱剂，内蒙古树脂柱厂家，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。

过柱和收集。柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。收集的例子：10mg上样量，1g硅胶H，0.5ml收一馏分；1-2g上样量，50g硅胶（200-300目），20-50ml收一馏分。

检测。要更多地使用喷显剂，如果仅用紫外灯，会损失较多产品，紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。

送谱。收集的产品旋干，在送谱前通常需要重结晶。如果样品太少或为液体，可过一小凝胶柱，作为送谱前的后纯化手段。可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶”峰。