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层析柱详细的操作方法是怎样的?
层析柱详细的操作方法:
以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例
1、吸附剂的处理及柱子装填
将一定量薄层层析硅胶装人搪瓷盘置于烘箱中,于105C活化2H后,取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充,填满整个柱体,不留死体积,密封后用柱塞式计量溶剂泵按一(5:95)比例泵人溶剂,至溶剂流出止。
2、上样
将冬凌草的乙醇提取物400G用适量溶解,泵人中压柱柱头,然后泵人1000RID。
蛋白层析柱操作流程
操作流程一般为:预处理、逆流洗柱、水洗、吸附、解吸和再生
1.预处理:在吸附树脂的生产过程中,一般采用的是工业级原料,大孔树脂柱,产品没有经过进一步纯化处理,树脂内部残留少量单体,大孔树脂柱生产商,所以在使用之前,需用水溶性溶剂对其浸泡处理,然后用去离子水通过树脂层,置换出水溶性溶剂离子方可投入使用。
2.逆流洗柱:用水洗出去水离子及破碎填料,树脂装入后,用蒸馏水反洗树脂层,直至出水清晰、无气味、无细碎树脂为止。再依次用酸碱等浸泡、冲洗树脂层,至出水呈中性为止。
3.水洗:水洗的主要目的是除去所附着的渣滓。
玻璃层析柱都有哪些优点呢
玻璃层析柱,开口大,加料快,不需要其他仪器的配合,上方可以做成标准口与其他的标口玻璃仪器相接,但有不容易测量,筛网下方容易残留很多液体,层析速度较慢,大孔树脂柱生产厂家,不准确的特点,一般用于对精度要求没有那么高的实验。
层析柱 的尺寸根据被分离物的量来确定,其直径与高度之比则根据被分离混合物的分离难易而定,一般在1∶8到1∶50之间。柱身细长,分离效果好,但可分离的量小,大孔树脂柱多少钱,且分离所需时间长;柱身短粗,分离效果较差,但一次可以分离较多的样品,且所需时间短。如果待分离物各组分较难分离,宜选用细长的柱子,如果要处理大量的较易分离的或对分离纯度要求较低的混合物,则可选用粗而短的柱子。常使用的层析柱,直径与长度之比在1∶8 到1∶15 之间。